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1、酶促反应发光剂　利用标记酶(辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)的催化作用，使发光剂(底物)发光。辣根过氧化物酶催化的发光剂为鲁米诺及其衍生物;碱性磷酸酶催化的发光底物为AMPPD。

2、直接化学发光剂　在发光免疫分析过程中不需酶的催化作用，直接参与发光反应，可直接标记抗原或抗体。吖啶酯是目前常用的直接标记发光剂。

1.吖啶酯：在碱性条件下被H2O2氧化时，发出波长为470nm的光，其激发态产物N-甲基吖啶酮是该发光反应体系的发光体。

2.三联吡啶钌：电化学发光剂，和电子供体三丙胺(TPA)在阳电极表面可同时失去一个电子发生氧化反应。